Isotherme Titrationskalorimeter

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TA Instruments | Waters ITC (Isothermal Titration Calorimetry, Isotherme Titrationskalorimetrie) ist ein hochauflösendes Verfahren zur vollständigen Charakterisierung von grundlegenden chemischen Eigenschaften einer Bindungswechselwirkung. Mit dem Verfahren werden Bindungskonstante, Reaktionsstöchiometrie und Gesamtreaktionsenergie von zwei oder mehr Mischungen (kleiner oder großer Moleküle) in Lösung bestimmt. Diese Bestimmung durch isotherme Titrationskalorimeter erfolgt durch die Messung der Wärme, die bei der Interaktion der Moleküle freigesetzt oder aufgenommen wird. Die Temperaturbedingungen lassen sich steuern, um die Temperaturabhängigkeit von Bindungen zu verstehen.

Das Affinity ITC umfasst ein hochempfindliches Kalorimeter und eine mechanisierte Spritze, die zuverlässig eine präzise Probenmenge in die kalorimetrische Zelle abgibt, die das Zielmolekül enthält. Sie ist softwaregesteuert, und Experimente werden so aufgesetzt, dass die Spritze in regelmäßigen Abständen winzige Probenvolumina abgibt. Zur unbeaufsichtigten Nutzung kann das Affinity ITC automatisiert werden, sodass es Proben direkt aus den temperaturgeregelten 96-Well-Platten abgibt. Durch eine automatisierte Reinigung werden Auswirkungen einer Probenverschleppung beseitigt, und die Möglichkeit zur automatischen Probenbeladung sorgt dafür, dass die Probe dem Instrument konsistent in gleicher Weise zugeführt wird.

Das Affinity ITC ermöglicht Forschenden, die Bindung ihrer Proben ohne den Einsatz exogener Markierungen oder Färbemittel zu charakterisieren. Dies vereinfacht Arbeitsabläufe und reduziert Fehler in der biopharmazeutischen Entwicklung. Forschende erfassen während der Bindungscharakterisierung zusätzlich stöchiometrische Daten, um nachzuweisen, ob eine 1:1-Bindungswechselwirkung erfolgt, wodurch die Notwendigkeit weiterer Prüfungen entfällt. Mit dem Affinity ITC können Forschende ihre Werkstoffe unter den gewünschten Bedingungen prüfen, ohne auf herstellerseitig verlangte Reagenzien zurückgreifen zu müssen. Forschende erfassen während der Bindungscharakterisierung zusätzlich stöchiometrische Daten und können nachweisen, ob eine 1:1-Bindungswechselwirkung erfolgt, wodurch die Notwendigkeit weiterer Prüfungen entfällt.

Das Affinity ITC ermöglicht eine Feststellung der Bindungsspezifität, d. h., auf Grundlage eines einzigen Experiments kann eine umfassend fundierte Entscheidung über Arzneimittelkandidaten getroffen werden. Die zugehörige NanoAnalyze-Datenanalysesoftware ermöglicht es Nutzern, Daten in Echtzeit zu analysieren, Overlaydiagramme zu erstellen und Arzneimittelkandidaten schnell zu vergleichen.