Calorimètres de titrage isotherme

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La calorimétrie de titrage isotherme (ITC) est une méthode à haute résolution pour la caractérisation complète des interactions de liaison. La méthode permet de déterminer la constante d’affinité, la stœchiométrie de la réaction et l’énergie totale de la réaction de deux ou plusieurs composés (petites ou grosses molécules) en solution. Les calorimètres de titrage isotherme mesurent la chaleur libérée ou absorbée lorsque les molécules interagissent entre elles. Les conditions de température peuvent être contrôlées pour comprendre la dépendance de la liaison à la température.

L’Affinity ITC TA Instruments | Waters se compose d’un calorimètre ultrasensible et d’une seringue automatisée qui délivre de manière fiable une quantité précise d’échantillon dans la cellule calorimétrique qui contient la molécule cible. Il est contrôlé par un logiciel ; des essais sont mis en place pour que la seringue délivre des volumes infimes d’échantillon à intervalles réguliers. L’Affinity ITC peut être automatisé pour délivrer des échantillons directement à partir de plaques de 96 puits à température contrôlée, pour une utilisation sans avoir besoin de rester près de l’instrument. Le nettoyage automatisé élimine les effets de la contamination croisée de l’échantillon ; le chargement automatisé de l’échantillon garantit que ce dernier est acheminé vers l’instrument de la même manière, à chaque fois.

L’Affinity ITC permet aux chercheurs de caractériser l’affinité de leurs échantillons sans utiliser de marqueurs ou de colorants exogènes, ce qui simplifie l’organisation des tâches et réduit les erreurs dans le développement biopharmaceutique. Les chercheurs recueillent simultanément les données de stœchiométrie pendant la caractérisation de la liaison pour vérifier si une interaction de stoechiométrie 1 à 1 se produit, éliminant ainsi le besoin d’autres tests. L’Affinity ITC permet aux chercheurs de tester leurs matériaux dans les conditions qu’ils souhaitent, sans dépendre des réactifs exigés par le fabricant. Les chercheurs recueillent simultanément les données de stœchiométrie pendant la caractérisation de la liaison et peuvent vérifier si une interaction de stoechiométrie 1 à 1 se produit, éliminant ainsi le besoin d’autres tests.

L’Affinity ITC fournit la spécificité de la liaison, de sorte qu’une décision sur les candidats-médicaments puisse être prise à partir d’un seul essai. Le logiciel d’analyse de données NanoAnalyze qui l’accompagne permet aux utilisateurs d’analyser les données en temps réel, de créer des graphiques de superposition et de comparer rapidement les candidats-médicaments.